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分析ELISA試劑盒操作的幾個(gè)小技巧

更新時(shí)間:2021-09-25點(diǎn)擊次數(shù):2023
  ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。為了保證ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,我們需要掌握一些小技巧以助于實(shí)驗(yàn)的成功,那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎?
  如若掌握了這些實(shí)驗(yàn)技巧之后,在做ELISA實(shí)驗(yàn)中,試驗(yàn)起來會(huì)更熟練,大大的降低了實(shí)驗(yàn)過程中的風(fēng)險(xiǎn),ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的入門新手掌握了這些知識(shí)后,操作起來都會(huì)快的多。
  ELISA試劑盒的相關(guān)操作技巧如下:
  1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
  2.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。
  3.在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的性,又能反映出試劑盒的精密度。
  5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對(duì)其性。
  6.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
  7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。
  8.ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
  9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
  10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。

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