酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)是一種免疫學技術(shù),用于檢測和測量特定蛋白質(zhì),如生物樣品中的抗體、抗原和激素等。ELISA試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測,自從60-70年代問世以來,得到世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領(lǐng)域中。
ELISA試劑盒實驗結(jié)果的處理也是尤為重要的,為大家分享ELISA試劑盒實驗結(jié)果的小建議:
1.ELISA實驗中樣品都要做復孔或三孔,然后計算每個濃度標準品的平均OD值,復孔的變異系數(shù)應該小于20%。
2.平均OD值減去空白孔的OD值。
3.制作標準曲線。以減去本底后的OD值為X軸,標準品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條最合適的方程。要想檢驗某條曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標準品的濃度作為未知數(shù),將對應的OD值帶入該方程,計算出標準品的濃度,得到的結(jié)果應該與實際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度最高的那條曲線。