更新時(shí)間:2019-09-04
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的問(wèn)題:
致使顯色不全、花板等成果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的因素及解決辦法總結(jié)于下
一、加樣
ELISA試劑盒也許因素:
1)血清或血漿標(biāo)本別離欠好即進(jìn)行加樣; 2)手藝操作中,加樣板過(guò)多形成加樣后放入孵箱前等待時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先天然寄存1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本搜集管,采血后有必要當(dāng)即倒置采血管混合5-10次,放置一段時(shí)刻后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢查,可放在2-8℃冰箱中,若要儲(chǔ)存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 4) 假如選用AT或別的全自動(dòng)加樣,挑選FAME或別的后處理儀器加酶試劑。 5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
二、 孵育
也許因素:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*; 2) 孵育時(shí)刻人為延長(zhǎng),致使非特異性聯(lián)系緊附于反響孔周?chē)?,難以清洗*。
解決辦法:
1) 貼封片或加蓋; 2) 按闡明過(guò)程嚴(yán)厲控制操作時(shí)刻。
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